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关于举办2025年水质检测员线上线下培训班的通知-微生物监测中采样点位布设

微生物监测是评估近岸河流水环境质量的重要环节，其采样点位的科学布设直接影响监测结果的代表性和准确性。本文结合《HJ 91.2—2022地表水环境质量监测技术规范》和《HJ 494—2009水质采样技术指导》两项标准，系统阐述近岸河流水域微生物采样点位的布置方法、技术要求及注意事项，以期为实际监测工作提供参考。

一、采样点位布置方法

（一）监测断面的类型与布设原则

根据HJ 91.2—2022要求，近岸河流水域监测需设置以下三类断面：

1.     对照断面：布设在河流进入城市或工业区前，避开污染源汇入处，用于获取背景水质数据。该断面需确保未受或极少受人类活动干扰，以反映河流原始微生物群落特征。

2.     控制断面：设置在主要排污口下游500米～1000米处，以反映污染物扩散后的水质特征；特殊区域（如水源保护区、渔业区）需增设控制断面。控制断面的数量和位置需根据污染源分布、污染物迁移转化规律及水文特征综合确定，确保覆盖主要污染风险区域。

3.     削减断面：布设于最后一个排污口下游1500米以外，用于评估污染物经自净后的浓度变化。削减断面需设置在水流充分混合、微生物群落恢复稳定的区域，以反映河流自净能力。

此外，若河流受潮汐影响（如近岸河口段），需考虑潮汐涨落对水质的影响，适当增加监测频率或调整断面位置。潮汐河流的对照断面一般设在潮区界以上，控制断面需根据潮汐特征调整采样时间，确保数据代表性。

（二）采样垂线与点位的布设

1.     垂线数量确定
 根据水面宽度确定垂线数：

·        ≤50米：设1条中泓垂线；

·        50米～100米：左、右岸各1条垂线；

·        ＞100米：左、中、右各1条垂线。 垂线布设需兼顾主流、支流交汇处及回水区，避免死水区或水流停滞区域。

2.     采样点层次划分
 根据水深设置垂线上的采样点：

·        ≤5米：仅表层（水面下0.3米～0.5米）；

·        5～10米：表层和底层（河底以上0.5米）；

·        ＞10米：增加中层（1/2水深处）。 特殊场景（如夏季深水区温度分层）需在温跃层上下增设采样点，以反映微生物分布的垂直差异。

3.     采样点位的优化与调整

·        空间覆盖性：兼顾河流主流、支流交汇处及回水区，避免死水区或水流停滞区域。

·        动态调整：根据水文条件（如丰水期与枯水期）、污染源变化定期复核点位代表性，必要时优化布设。例如，汛期需增加支流汇入处的采样点，以捕捉面源污染影响。

二、微生物采样的技术要求

（一）采样设备与容器选择

1.     设备要求：使用无菌采样器（如灭菌采水器），避免交叉污染；自动采样设备需符合HJ 494-2009中“瞬时非自动采样”规范。采样前需对设备进行灭菌处理，确保无菌操作。

2.     容器材质：预先灭菌处理的棕色玻璃瓶、聚乙烯瓶或无菌水样采集袋，避免光照导致微生物活性变化。容器需密封良好，防止运输过程中样品泄漏或污染。

（二）采样操作规范

1.     采样顺序：微生物样品应优先采集，避免其他项目采样干扰水质。例如，先采集微生物样品，再采集理化指标样品，以防止消毒剂残留影响微生物群落。

2.     样品体积：根据检测项目需求确定，通常需采集500 mL～1000 mL，确保检测灵敏度。常规微生物检测需采集250 mL～500 mL水样，厌氧菌培养需采集满瓶样品以减少氧气干扰。

3.     现场记录：详细记录采样时间、水温、pH、流速及周边环境信息，为数据分析提供背景支持。记录需包括采样点位坐标、天气状况、周边污染源等信息。

（三）样品的保存与运输

1.     保存条件：微生物样品需冷藏（4℃）并在24小时内完成检测；若需延迟检测，应采用低温保存或添加保护剂（如硫代硫酸钠用于消除余氯）。

2.     运输要求：避免剧烈震荡，保持冷链运输，防止样品变质。运输过程中需使用保温箱或冷藏车，确保温度稳定。

三、注意事项

（一）避免污染的控制措施

1.     采样前处理：清洗采样设备时使用无菌水，避免残留消毒剂影响微生物群落。例如，用75%乙醇擦拭采样器表面，再用无菌水冲洗3次。

2.     操作防护：采样人员需佩戴无菌手套，避免直接接触样品瓶口。操作过程中需使用无菌镊子或工具，防止手部污染。

（二）特殊环境适应性

1.     高浊度水体：需增加采样体积或通过预过滤去除悬浮物干扰。例如，采集1000 mL水样，经0.45μm滤膜过滤后检测。

2.     潮汐河流：需在涨潮和退潮期间分别采样，以评估盐度变化对微生物的影响。潮汐河流的采样时间需根据潮汐表确定，确保数据可比性。

（三）质量控制要求

1.     平行样采集：每批次样品至少采集10%的平行样，确保数据可靠性。平行样需同时采集、同步处理，以评估采样重复性。

2.     空白样设置：包括现场空白和运输空白，用于识别采样过程中的潜在污染。现场空白需在采样点打开容器盖后立即密封，运输空白需在运输过程中保持密封状态。