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举办无菌检验员培训班报名微生物检验员证书报考通知-生物实验室无菌控制经验

无菌控制对于发酵是需要直面的问题，对于生物实验室也应是管理中的重要一项，这关乎到实验效率、实验结果判断等。

一、布局

实验室在设计时就需要根据现有及将来可能的情况而充分考虑布局。合理的人流可减少可能的污染及交叉污染。

1.     区域划分：分子区、发酵区与公共区应该尽可能地分离，超净台最好在独立隔离间而尽量避免放置于门口，以减少使用时外部风的回灌可能；洁具与垃圾桶不应该放置于上风口；水电需一次性考虑到位，减少水的滴漏与排水堵塞，降低每次停电的影响与过多的操作；冰箱与烘箱，与灭菌锅应该尽量远离；试剂配置、搅拌溶解与调pH又需在临近区域。

2.     摇床与发酵罐：摇床考虑不同温度外，还需要配备专用的与可以临时混用的摇床；放置摇床区域应该比较独立，需要考虑周围环境的排风换气能力与散热效果，一般放置在通风较好的环境下。发酵罐配套的压缩机的采风口需要靠近上风口；发酵罐的排气不影响其他。

二、环境控制

人始终是可能的最大污染源，需从工作服的清洗、穿戴，消毒液的配置与更换，手的消毒开始关注每一步骤。

1.     人员操作：无菌操作前，得注意鞋口、袖口、领口与帽口锁紧，在超净台操作前需等待2-3分钟，让气流稳定；操作过程中，尽量避免双手交叉、物品之间相互触碰，另外其他人走路时也尽量慢一些使周围环境不因走动速度过快而起风；操作后及时清洁。

2.     环境维护：桌子及台子需经常擦拭，避免灰尘与死角；超净台利用前后得擦拭消毒；其他物品的摆放，一般要求是用与放都得顺手，标识后定置放置。移液枪如不灭菌，尽量是各实验独立一套，并按其要求及时维护；其他设备按要求定期维护；垃圾桶及时倾倒，活性物质灭活处理；下水道及水池周边无污渍沉积，并定期用次氯酸钠或者新洁尔灭、酒精等消毒剂喷洒消毒。

三、操作

操作一定按照老师所教导的方法操作，前期最好是“复制式操作”，即老师如何教就如何做；最好是“目触及式操作”，即眼睛紧盯操作，“手随目转”。这个过程需要“专心”地学，“细心”地练习，经历一个反复练习、熟能生巧直到独立操作的过程。

1.     灭菌锅使用：灭菌锅使用时尽量不要装太满，各物品装袋子时也尽量不要装太满，以保障灭菌效果。特别要注意灭菌后物料拧盖时机与物料遇冷后首次开盖时的操作；特别要注意不同材质的物料灭菌后在外部降温时的风险与操作。

2.     无菌物品管理：无菌物品和非无菌物品必须分开放置，并有明显标志，无菌物品不能暴露于空气中，应存放在无菌包或无菌容器中，无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，物品按失效期先后顺序摆放。

四、强化理解

无菌控制需要提升对各方面的理解。老师为什么要这么操作？灭菌工艺为什么是这样？灭菌前物料的包装与灭菌后拆包装的操作为什么是这样？为什么要注意这些细节？何为无菌风险？结合所学知识，延展及探究环境消毒，各种菌的生长习性，就开始有系统化的无菌控制思维。

1.     无菌技术概念：无菌技术是在医疗、护理操作中，防止一切微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区域被污染的操作技术。无菌区指经灭菌处理且未被污染的区域，非无菌区指未经过灭菌处理或经过灭菌处理后又被污染的区域，无菌物品指未经过物理或化学方法灭菌后保持无菌状态的物品。

2.     消毒与灭菌：清洁是清除物品上的一切污秽，目的是去除和减少微生物，但并非杀灭微生物；消毒是指用物理或化学方法清除或杀灭物体上的病原微生物，不包括细菌的芽孢，使之减少到不能引起感染或致病；灭菌是用物理或化学方法杀灭一切致病和非致病微生物，包括细菌的芽孢。

五、解决偏差

无菌控制是纠偏与预纠偏结合的技术，如发现有染菌，及时地分析出杂菌种属及来源，针对性地分析原因与解决。

1.     偏差分析：解决无菌偏差可能需要更多更深更系统的知识，偏差出现后分析是什么菌，如何通过性状或者16S检测判定，而又如何找到确定的来源，最后如何解决与避免，这又是知识、经验与能力的体现。

2.     预防性检查：再预防性地发现相关问题，如设备异响就需要做临时性检查；突然停水、电之后就及时系统检查等等。

六、总结

无菌室的设计首要原则是确保实验环境的洁净度、安全性和实验结果的准确性。这一原则贯穿于整个设计过程中，具体体现在洁净度要求、合理分区、洁净度等级、过滤系统、防污染设计等多个方面。