计量员证书 內校员资格证 计量管理员培训 计量校准员考证 计量检定员考试 计量检测员报名 量规仪器校正员培训 内部校验员合格证 内部校准员上岗证 计量内审员岗位证 仪校员证书 计量工资质 计量师资格证书 计量证怎么考 內校证书哪里考 农产品食品检验员资格证 食品化验员证书 食品检验工培训 食品检测员考证 食品安全总监 农产品质量安全检测员 乳品检验员 油品检验员 化学检验员培训 水质检测员考试 化妆品检验员报名 微生物检验员证书 化验员上岗证 微检员证书 无菌检验员 卫生消毒产品检验员 医疗器械检验员 化学分析工考证 试验员 质检员 实验员 无损检测员 内审员 内部审核员 材料物理性能检验员 金相检验员 力学性能检验员 材料成分分析工 环境监测员资格证考试报名 圣问技术职业技能培训中心 广州圣问技术服务有限公司
想当食品检验员?从“小白”到“技术大拿”实操+考证攻略-实验室霉菌检测中的常见问题
引言
霉菌并非分类学上的专业术语，而是对一类丝状真菌的统称，属于真菌界的重要组成部分。这类微生物对人类社会具有双重影响：一方面，霉菌在酿造工业、发酵工艺、抗生素及酶制剂生产等领域发挥着不可或缺的作用；另一方面，它们也是农副产品、食品原料及器材腐败的元凶，能够引发人类、动植物多种疾病。尤为值得注意的是，少数霉菌种类，如黄曲霉，能产生强致癌物质——黄曲霉毒素，严重威胁人畜健康与生命安全。因此，霉菌检测在保障食品安全方面占据举足轻重的地位。
食品中常见霉菌类型
食品中常见的霉菌主要包括毛霉属、根霉属、曲霉属及青霉属等。这些霉菌种类繁多，分布广泛，对食品安全的潜在威胁不容忽视。
霉菌检测中的关键注意事项
1. 取样的代表性
取样是霉菌检测的首要环节，其代表性直接影响到检测结果的准确性。因此，在取样过程中，应确保样本能够全面反映被检测对象的整体状况。
2. 取样工具的无菌处理
空气中霉菌孢子含量极高，取样工具及容器若未经严格高压灭菌处理，极易引入外源污染，影响检测结果。因此，取样前必须对所有工具及容器进行彻底灭菌。
3. 检样方法
· 操作人员防护：霉菌易被携带，检样时操作人员应穿戴无菌防护服，避免自身携带的霉菌污染样本。
· 样品均质与振摇：部分霉菌孢子呈串状分布，均质及充分振摇可使孢子充分散开，提高检测准确性。同时，在梯度连续稀释时，需用灭菌吸管反复吹吸，确保孢子均匀分布。
4. 培养条件控制
· 培养温度与时间：霉菌培养通常在25-28℃下进行，3天后开始观察，但需持续观察一周以获取完整生长信息。
· 培养基选择：常用培养基包括孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂及高盐察氏琼脂等，应根据检测目的选择合适的培养基。
5. 检样中常见问题及原因分析
· 不同稀释度计数结果相同：可能由于稀释时未经充分振摇、吹吸，导致孢子未均匀分布。
· 不生长或生长成片无法计数：可能由于培养基不适宜（如pH值过低）、观察时间不当或孢子未充分散开所致。
微生物操作中常见问题的深入讨论与分析
1. 划不出单个菌落的原因
· 平板水分过多：影响菌落形成。
· 接种环未灼烧：导致交叉污染。
· 多区划线：三区或四区划线可能使菌落过于密集。
2. 涂布与倾注法的比较
· 涂布法：利于观察菌落形态，但涂布棒可能携带少量菌液，影响计数准确性。
· 倾注法：更为准确，但不利于观察菌落状态。对于霉菌计数而言，涂抹法在培养出的菌落数、培养时间及菌落形态发育方面均优于倾注法。
3. 培养基的选择与优化
培养基的选择应根据实验材料和检测目的来确定。例如，PDA和RBC适合一般霉菌和酵母菌生长，而CAO则适合高渗性霉菌生长。对于耐高渗性霉菌，如局限曲霉、谢瓦曲霉等，在高渗培养基如M40Y、DG18上生长更佳。因此，同时采用PDA和M40Y（或DG18）进行分离培养，能更全面地反映污染霉菌的菌相。
4. 培养基配制中的注意事项
· 灭菌温度控制：含糖量较高的培养基灭菌温度不宜过高，以防糖分焦化。
· 琼脂培养基的处理：不能反复溶化，以免破坏营养成分。
· 培养基的保存：大多数平板需避光低温保存，干粉培养基应避光干燥保存。
5. 添加剂的添加与温度控制
· 温度掌握：卵黄和抗生素类添加剂的添加温度不宜过高。
· 定量添加：过多会抑制目标菌生长，过少则导致杂菌过度生长。
6. 培养温度的精准掌握
· 真菌类：25-28℃培养。
· 细菌类：如李氏菌在增菌和生化中要求30℃左右培养。
· 其他微生物：一般在36℃左右培养。
7. 接种方法的多样性
常用的接种方法包括划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、涂布接种及液体接种等，应根据实验需求选择合适的接种方法。
8. 革兰氏染色与生化实验的技巧
· 革兰氏染色：掌握染色时间和冲洗方法，确保染色效果。
· 生化实验：注意接种方法、氧化型和发酵型实验操作、阳性菌种对照及接种前的纯化步骤。
9. 最适计数范围的选择
霉菌菌落扩散性强，选择合适的稀释度进行计数至关重要。一般来说，每平板含有10~50个菌落的稀释度时的计数结果与显微镜计数最为接近。对于菌丝丰富、菌落扩散性强的菌株，应在更少的范围内计数（如30个/平皿以内）。为控制霉菌生长速度和菌落范围，可在培养基中添加少量抗生素。
10. 杀菌相关概念的明确
· 抑制：微生物在亚抑制剂量因子作用下生长停止，但移去因子后生长可恢复。
· 死亡：微生物在致死剂量因子作用下或亚致死剂量因子长时间作用下生长能力不可逆丧失。
· 防腐：利用化学物质或物理因子防止或抑制微生物生长的措施。
· 消毒：杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的措施。
· 灭菌：杀死物体中包括芽孢在内的所有病原微生物的措施。
· 化疗：利用具有选择毒性的化学物质对生物体内部被微生物感染的组织或病变细胞进行治疗的措施。
结论
实验室霉菌检测是一项复杂而精细的工作，涉及多个环节和关键因素。通过深入了解霉菌的特性、选择合适的检测方法和培养基、严格控制实验条件以及掌握微生物操作技巧，我们可以有效提高霉菌检测的准确性和可靠性，为保障食品安全提供有力支持。
